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了解一下GPC分子量测试的分离机理吧

发布日期: 2021-01-13
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  GPC分子量测试(Gel Permeation Chromatography ) ,凝胶渗透色谱,又称为尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography,简称SEC),它是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离相对分子质量较小的物质,并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。
 
  目前关于凝胶渗透色谱的分离机理存在着以下几种基本理论:
 
  1.立体排斥理论;
 
  2.有限扩散理论;
 
  3.流动分离理论。
 
  除上述理论外,尚有分子热力学理论和二次排斥理论等。
 
  由于应用立体排斥理论解释凝胶渗透色谱中的各种分离现象与事实比较一致,因此立体排斥理论已为人们普遍采用。即:它的分离基础主要依据溶液中分子体积(流体力学体积)的大小来进行分离。
 
  凝胶渗透色谱的分离过程是在装有多孔物质为填料的色谱柱中进行的,一个填料的颗料含有许多不同尺寸的小孔(这些小孔具有一定的分布),这些小孔对于溶剂分子来说是很大的,它们可以自由地扩散出入。
 
  由于高聚物在溶液中以无规线团的形式存在,且高分子线团也具有一定的尺寸,当填料上的孔洞尺寸与高分子线团的尺寸相当时,高分子线团就向孔洞内部扩散。
 
  显然,尺寸大的高聚物分子,由于只能扩散到尺寸大的孔洞中,在色谱柱中保留的时间就短;而尺寸小的高聚物分子,几乎能够扩散到填料的所有的孔洞中,向孔内扩散的较深,在色谱柱中保留的时间就长。
 
  因此,不同分子量的高聚物分子就按分子量从大到小的次序随着淋洗液的流出而得到分离。
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